TES KATALASE DAN TES OKSIDASE (OXIDASE) │ komposisi reagen katalase dan oksidase │ info │ kuliah

KATALASE TEST

Reagensia:

-larutan H2O2 10%.

-Cultur bacteri yg akan diperiksa.

Pelaksanaan test:

-dikenal ada 2 cara yaitu Slide test dan Cultur Test.

a. slide test

*Teteskan 1 tetes H2O2 10% pd kaca objek

*tambahkan koloni bakteri yg akan diperiksa secekupnya, campur baik-baik.

*perhatikan ada tidaknya pembentukan gelembung udara.

b. Cultur test:

*koloni bacteri yg pada nutrient agar, Tryptose Soy agar, BHI agar atau cultur pada BHI broth, ditetesi dengan H2O2 10%.

*perhatikan ada tidaknya pembentukan gelembung udara.

Pembacaan:

-Katalase test Positif: ada gelembung udara.

-Katalase test negatif: tidak ada gelembung udara.

Kontrol Test:

-Katalase test positif: Staphylococci, Micrococci

-Katalase test negatif: Streptococci, pneumococco.

OKSIDASE TEST

Reagensia:

-laruan 1% di/tetra methyl para phenylen diamine dihydrochloride di dalam aquadest. Atau boleh menggunakan identification sticks oxidase.

-koloni bacteri pada media agar.

Palaksanaan test:

-Cara I: Koloni bacteri yang diperiksa ditetesi reagen oxidase.

-Cara II: Koloni bacteri yang diperiksa dipulaskan pada kertas saring yang suda dibasahi dengan reagen oxidase

-Cara III: Koloni bacteri yang diperiksa diambil dengan identification sticks oxidase.

Pembacaan:

-Oxidase tes positif: apabila koloni/reagennya berubah warna menjadi merah muda-hitam.

-Oxidase test negatif: apabila koloni/reagennya tidak berubah warna.

Kontrol test:

-oxidase test positif: Gonococci, Pseudomonas, Vibrio.

-oxidase test negatif: Salmonella, Shigella, Staphylococcus.

Test Katalase

Tujuan: mendeteksi adanya enzim katalase yang diproduksi oleh bakteri tertentu, misalnya membedakan antara micrococcaceae dan stretococci.

Persiapan: 1. Larutan H2O2 3% (suhu reagen sama dengan suhu kamar) diletakkan di atas kaca objek.

2. Dengan lidi kayu berujung lancip koloni bakteri diambil sedikit dan langsung dicampur dengan reagen diatas objek gelas.

3. terjadinya gelembung udara berarti tes positif.

Tes Oxidase

Tujuan: untuk mengetahui jenis bakteri yang memproduksi cyctochrome oxidase, misalnya golongan Neisseria

Persiapan: 1. Koloni/pertumbuhan bakteri yang akan di tes umur 18-24 jam.

2. secarik kertas saring yang bersih dan kering

3. Reagen oksidase (tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride 1 % baru dibuat)

4. lidi kayu/tusuk gigi yang bersih.

Cara kerja:

1.       Kertas saring ditetesi 3 tetes reagen sampai basah

2.       Dengan lidi kayukoloni bakteri diambil sedikit dan digosokkan pada bagian kertas saring yang basah.

3.       Terjadinya warna biru violet dalam waktu 10 detik, berarti tes positif.

4.       Tes dapat pula dilakukan dengan menetesi koloni bakteri dengan reagen, yang penilaiannya sama dengan di atas.

Ada juga reagen yang siap pakai berupa stik atau drop yg dapat digunakan untuk tes oksidase, mengenai prosedur tercantum pada brosurnya